ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДНК ВПЧ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ВУЛЬВЫ В ТКАНИ ОПУХОЛИ, ПЕРИФОКАЛЬНОЙ ОБЛАСТИ И ЗДОРОВОЙ ТКАНИ
Цель: определить частоту выявления ДНК ВПЧ в ткани опухоли, перифокальной зоны и здоровой ткани у больных раком вульвы.
Материал и методы. Материал для исследования отбирали интраоперационно. Приготовле-
ние гомогената нефиксированных тканей и экстракцию ДНК из них проводили непосредственно после взятия образца или после кратковременного замораживания при температуре -70 °С. ДНК вируса из гомогената ткани выделяли методом сорбции на магнитных частицах в автоматическом режиме на приборе MagNa Pure Compact (Roch, Швейцария). Выявление ДНК и определение генотипа ВПЧ высокого (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59-й типы) и низкого (6-й и 11-й типы) онкогенного риска проводили методом мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационнофлуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени. Исследовали образцы ткани опухоли, перифокальной зоны и здоровой ткани от 82 больных раком вульвы в возрасте 30–83 лет.
Результаты. ДНК ВПЧ низкого онкогенного риска (11-й генотип) была обнаружена в тканях опухоли у 8,6% больных. Инфицированность больных раком вульвы ВПЧ высокого канцерогенного риска составила 36,5%. При определении наличия ДНК ВПЧ в зависимости от стадии заболевания оказалось, что в I стадии ДНК ВПЧ в единственном числе и в ассоциациях обнаружена у 50%, во II стадии – у 39% и в III стадии – у 12,5% больных, т.е. чем больше стадия заболевания, тем реже определяется в тканях ДНК ВПЧ.
Из всех больных, инфицированных ВПЧ, в единственном числе ДНК ВПЧ определена у 73,3%, а в ассоциациях – у 26,7%. Наиболее часто среди больных с одним генотипом встречались 16-й и 18-й генотипы ДНК ВПЧ (55,5 и 22,2%) и по 11% – 52-й и 56-й генотипы. Среди всех образцов генотипов и в единственном числе, и в ассоциациях также наиболее часто встречался 16-й генотип – у 43,75%, 1-й генотип встречался, как и 31-й, по 12,5%, а 31, 33, 51, 52 и 58-й – по 6,2%. В перифокальной зоне ДНК ВПЧ высокого канцерогенного риска выявлена у 34,6%. Из общего количества ВПЧ-позитивных образцов 16-й генотип обнаружен у 55%, остальные (18, 31, 56-й) и ассоциации – по 11,1%. В здоровой ткани ДНК ВПЧ выявлена у 29% больных,
в единственном числе генотипы 16, 18, 53, 56-й встречались у 63,7%, а у 36,3% – в ассоциациях. 16-й генотип встречался чаще, чем другие, – у 36,4%.
Выводы. Установлено инфицирование ВПЧ не только ткани опухоли (36,5%), но и перифокаль-
ной (36,6%), а также здоровой ткани у больных раком вульвы (29%). Во всех образцах тканей преобладали 16-й и 18-й генотипы. Ассоциации разных генотипов вируса чаще встречались в здоровой ткани, чем в опухолевой. Инфицированность ДНК ВПЧ наиболее высока в I стадии заболевания, затем во II стадии и ниже всего в III стадии.
Неродо Г.А., Зыкова Т.А., Иванова В.А., Неродо Е.А., Богомолова О.А.
Цель: определить частоту выявления ДНК ВПЧ в ткани опухоли, перифокальной зоны и здоровой ткани у больных раком вульвы.
Материал и методы. Материал для исследования отбирали интраоперационно. Приготовле-
ние гомогената нефиксированных тканей и экстракцию ДНК из них проводили непосредственно после взятия образца или после кратковременного замораживания при температуре -70 °С. ДНК вируса из гомогената ткани выделяли методом сорбции на магнитных частицах в автоматическом режиме на приборе MagNa Pure Compact (Roch, Швейцария). Выявление ДНК и определение генотипа ВПЧ высокого (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59-й типы) и низкого (6-й и 11-й типы) онкогенного риска проводили методом мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационнофлуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени. Исследовали образцы ткани опухоли, перифокальной зоны и здоровой ткани от 82 больных раком вульвы в возрасте 30–83 лет.
Результаты. ДНК ВПЧ низкого онкогенного риска (11-й генотип) была обнаружена в тканях опухоли у 8,6% больных. Инфицированность больных раком вульвы ВПЧ высокого канцерогенного риска составила 36,5%. При определении наличия ДНК ВПЧ в зависимости от стадии заболевания оказалось, что в I стадии ДНК ВПЧ в единственном числе и в ассоциациях обнаружена у 50%, во II стадии – у 39% и в III стадии – у 12,5% больных, т.е. чем больше стадия заболевания, тем реже определяется в тканях ДНК ВПЧ.
Из всех больных, инфицированных ВПЧ, в единственном числе ДНК ВПЧ определена у 73,3%, а в ассоциациях – у 26,7%. Наиболее часто среди больных с одним генотипом встречались 16-й и 18-й генотипы ДНК ВПЧ (55,5 и 22,2%) и по 11% – 52-й и 56-й генотипы. Среди всех образцов генотипов и в единственном числе, и в ассоциациях также наиболее часто встречался 16-й генотип – у 43,75%, 1-й генотип встречался, как и 31-й, по 12,5%, а 31, 33, 51, 52 и 58-й – по 6,2%. В перифокальной зоне ДНК ВПЧ высокого канцерогенного риска выявлена у 34,6%. Из общего количества ВПЧ-позитивных образцов 16-й генотип обнаружен у 55%, остальные (18, 31, 56-й) и ассоциации – по 11,1%. В здоровой ткани ДНК ВПЧ выявлена у 29% больных,
в единственном числе генотипы 16, 18, 53, 56-й встречались у 63,7%, а у 36,3% – в ассоциациях. 16-й генотип встречался чаще, чем другие, – у 36,4%.
Выводы. Установлено инфицирование ВПЧ не только ткани опухоли (36,5%), но и перифокаль-
ной (36,6%), а также здоровой ткани у больных раком вульвы (29%). Во всех образцах тканей преобладали 16-й и 18-й генотипы. Ассоциации разных генотипов вируса чаще встречались в здоровой ткани, чем в опухолевой. Инфицированность ДНК ВПЧ наиболее высока в I стадии заболевания, затем во II стадии и ниже всего в III стадии.
Неродо Г.А., Зыкова Т.А., Иванова В.А., Неродо Е.А., Богомолова О.А.