АНГИОГЕННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ МЕЛАНОЦИТАРНЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ КОЖИ
Цель: изучить экспрессию маркеров, контролирующих ангиогенез (CD31, VEGF) в ткани меланоцитарных образований кожи.
Материал и методы. В исследование были включены 15 больных с пигментными доброкаче-
ственными образованиями кожи, включая пять больных с диспластическими невусами и 11 больных с поверхностно-распространяющейся и узловой меланомой кожи в возрасте от 21 до 49 лет. Иммуногистохимическое исследование проводили на срезах с парафиновых блоков. В работе использованы первичные мышиные моноклональные антитела CD31 и VEGF, для визуализации – система детекции Reveal Biotin-Free Polyvalent DAB. В каждом конкретном случае количественно подсчитывали долю клеток (в %), окрашенных антителами к VEGF. Для оценки ангиогенеза использовали индекс внутриопухолевой микрососудистой плотности (intratumor microvesse ldensity – MVD). Микрососуды окрашивали антителом CD31.
Количество сосудов определяли в каждом поле зрения препарата при использовании объектива ±40 с использованием программы AxioVs40 v-4.8.1.0. Статистический анализ результатов исследования проводился с помощью программы Statistica 7.0 (StatSoftInc., США) и MedCalc (версия 9.3.5.0).
Результаты. При иммуногистохимическом исследовании экспрессия VEGF выявлена в цитоплазме клеток меланомы в 100% случаев (11), тогда как в доброкачественных образованиях – в 66,7% (10). Отсутствие экспрессии VEGF в клетках невусов отмечалось в 33,3% (5).
Разброс окрашенных клеток антителами к VEGF и в меланомах, и в невусах очень неоднороден и составлял от менее 5% и до 50%, при этом нами выявлены достоверно значимые различия в экспрессии VEGF среди исследуемых групп, где среднее содержание клеток VEGF+ в меланомах составило 32,5 ± 2,9%, тогда как в невусах на их долю приходилось 23,8 ± 2,1% (р < 0,05). При количественной оценке внутриопухолевой микрососудистой плотности выявлено, что среднее количество сосудов микроциркуляторного русла в поле зрения при меланоме и невусах составило 10,0 ± 0,9 и 4,1 ± 0,4 соответственно, результаты экспрессии CD31 статистически достоверны (р < 0,05). Разброс количества сосудов, окрашенных CD31, в меланомах составил от 4 до 18 в одном поле зрения. В невусах в 12 случаях (80%) подсчитывалось не более 4, и только в гигантоклеточных невусах (3–20%) было отмечено до 15 сосудов в одном поле зрения.
Выводы. Выявленный высокий ангиогенный потенциал меланомы может являться дополнительным критерием опухолевой прогрессии и злокачественной трансформации меланоцитарных новообразований кожи, способствующим разработке новых подходов к диагностике и прогнозированию течения заболевания.
Новикова И.А., Максимова Н.А., Позднякова В.В., Максимова М.И., Ульянова Е.П., Гранкина А.О., Ильченко М.Г.
Цель: изучить экспрессию маркеров, контролирующих ангиогенез (CD31, VEGF) в ткани меланоцитарных образований кожи.
Материал и методы. В исследование были включены 15 больных с пигментными доброкаче-
ственными образованиями кожи, включая пять больных с диспластическими невусами и 11 больных с поверхностно-распространяющейся и узловой меланомой кожи в возрасте от 21 до 49 лет. Иммуногистохимическое исследование проводили на срезах с парафиновых блоков. В работе использованы первичные мышиные моноклональные антитела CD31 и VEGF, для визуализации – система детекции Reveal Biotin-Free Polyvalent DAB. В каждом конкретном случае количественно подсчитывали долю клеток (в %), окрашенных антителами к VEGF. Для оценки ангиогенеза использовали индекс внутриопухолевой микрососудистой плотности (intratumor microvesse ldensity – MVD). Микрососуды окрашивали антителом CD31.
Количество сосудов определяли в каждом поле зрения препарата при использовании объектива ±40 с использованием программы AxioVs40 v-4.8.1.0. Статистический анализ результатов исследования проводился с помощью программы Statistica 7.0 (StatSoftInc., США) и MedCalc (версия 9.3.5.0).
Результаты. При иммуногистохимическом исследовании экспрессия VEGF выявлена в цитоплазме клеток меланомы в 100% случаев (11), тогда как в доброкачественных образованиях – в 66,7% (10). Отсутствие экспрессии VEGF в клетках невусов отмечалось в 33,3% (5).
Разброс окрашенных клеток антителами к VEGF и в меланомах, и в невусах очень неоднороден и составлял от менее 5% и до 50%, при этом нами выявлены достоверно значимые различия в экспрессии VEGF среди исследуемых групп, где среднее содержание клеток VEGF+ в меланомах составило 32,5 ± 2,9%, тогда как в невусах на их долю приходилось 23,8 ± 2,1% (р < 0,05). При количественной оценке внутриопухолевой микрососудистой плотности выявлено, что среднее количество сосудов микроциркуляторного русла в поле зрения при меланоме и невусах составило 10,0 ± 0,9 и 4,1 ± 0,4 соответственно, результаты экспрессии CD31 статистически достоверны (р < 0,05). Разброс количества сосудов, окрашенных CD31, в меланомах составил от 4 до 18 в одном поле зрения. В невусах в 12 случаях (80%) подсчитывалось не более 4, и только в гигантоклеточных невусах (3–20%) было отмечено до 15 сосудов в одном поле зрения.
Выводы. Выявленный высокий ангиогенный потенциал меланомы может являться дополнительным критерием опухолевой прогрессии и злокачественной трансформации меланоцитарных новообразований кожи, способствующим разработке новых подходов к диагностике и прогнозированию течения заболевания.
Новикова И.А., Максимова Н.А., Позднякова В.В., Максимова М.И., Ульянова Е.П., Гранкина А.О., Ильченко М.Г.
